<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">fruitberry</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Плодоводство и ягодоводство России</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Pomiculture and small fruits culture in Russia</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">2073-4948</issn><publisher><publisher-name>ФГБНУ ВСТИСП</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.31676/2073-4948-2025-80-25-36</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">fruitberry-1343</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ГЕНЕТИКА, СЕЛЕКЦИЯ, СЕМЕНОВОДСТВО</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>GENETICS, BREEDING, SEED PRODUCTION</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Сравнение протоколов экстракции ДНК из растительного материала вишни обыкновенной и черешни</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Comparison of DNA extraction protocols from sour and sweet cherry</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Спивак</surname><given-names>В. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Spivak</surname><given-names>V. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>В. В. Спивак, мнс, аспирант</p><p>Москва</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Moscow</p></bio><email xlink:type="simple">vl.spivak@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>Федеральный научный селекционно-технологический центр садоводства и питомниководства</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Federal Horticultural Center for Breeding, Agrotechnology and Nursery</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2025</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>25</day><month>03</month><year>2025</year></pub-date><volume>80</volume><issue>0</issue><fpage>25</fpage><lpage>36</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Спивак В.В., 2025</copyright-statement><copyright-year>2025</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Спивак В.В.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Spivak V.V.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.plodovodstvo.com/jour/article/view/1343">https://www.plodovodstvo.com/jour/article/view/1343</self-uri><abstract><p>Для создания новых сортов плодовых культур важно эффективно использовать генетические ресурсы, исследуя их современными методами молекулярной биологии и генетики, что требует высококачественных образцов ДНК. Экстракция ДНК из растительного материала сложна из-за ингибирующих веществ, таких как полифенолы и полисахариды. В исследовании проведено сравнение четырех модификаций ЦТАБ-метода для экстракции ДНК из лиофилизированных листьев вишни обыкновенной (сорта ‘Ассоль’, ‘Белые Журавли’, ‘Русинка’) и черешни (сорта ‘Подарок Рязани’, ‘Фатеж’, ‘Чермашная’). Испытаны модификации с изменением состава лизирующего буфера и отмывочного раствора. Контрольный метод – оригинальный ЦТАБ. Экстракция проводилась в трехкратной повторности. Концентрация и чистота ДНК измерялись на спектрофотометре, деградация оценивалась с помощью электрофореза, а ингибиторы – с использованием ПЦР в реальном времени. В ходе проведенного исследования установлено, что первая модификация метода ЦТАБ обеспечивает получение образцов ДНК с наивысшей степенью чистоты. Анализ спектрофотометрического показателя А260/280 продемонстрировал значения в диапазоне от 1,89 до 1,91 со средним значением 1,87 для первой модификации. Вторая модификация также позволила получить высокоочищенные образцы ДНК, однако в некоторых было отмечено присутствие незначительного количества РНК. Показатель А260/230 подтвердил преимущество первой модификации ЦТАБ-метода в получении высокоочищенной ДНК. Среднее значение составило 2,08, что сопоставимо с показателем оригинального метода. Определение концентрации ДНК в водных растворах выявило наибольший выход ДНК при использовании первой модификации ЦТАБ-метода. Концентрация варьировалась от 594,80 до 852,10 мкг/мл со средним значением 700,82. Статистический анализ подтвердил достоверное превосходство первой модификации по сравнению с контролем (и другими модификациями) в отношении показателей чистоты и выхода ДНК. На основании полученных результатов первая модификация ЦТАБ-метода рекомендована как оптимальный вариант для экстракции ДНК из растительного материала вишни обыкновенной и черешни.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>The creation of new varieties of fruit crops is impossible without efficient use of genetic resources based on modern methods of molecular biology and genetics, which requires high-quality DNA samples. Extraction of DNA from plant material is a challenging task due to the presence of various inhibitory substances, such as polyphenols and polysaccharides. In this study, we set out to compare four modifications of the original CTAB protocol for DNA extraction from lyophilized leaves of sour cherry (Prunus cerasus) of the Assol, Belyye Zhuravli, and Rusinka varieties and sweet cherry (Prunus avium) of the Podarok Ryazanii, Fatezh, and Chermashnaya varieties. Modifications implying changes in the composition of lysing buffer and washing solution were tested. The original CTAB protocol was used as the control. The extraction was performed in triplicate. DNA concentration and purity were measured using a spectrophotometer; degradation was evaluated by electrophoresis; inhibitors were evaluated using real-time PCR. The conducted study revealed that modification 1 of the CTAB protocol produces DNA samples with the highest degree of purity. An analysis of the A260/280 spectrophotometric index showed values ranging from 1.89 to 1.91 with a mean of 1.87 for modification 1. Modification 2 also yielded high-purity DNA samples, although with the presence of minor RNA amounts in some of them. The A260/230 parameter confirmed the superiority of CTAB modification 1 in obtaining high-purity DNA. The mean value was 2.08, which is comparable to that of the original method. Determination of DNA concentration in aqueous solutions revealed the highest DNA yield when using CTAB modification 1. The concentration ranged from 594.80 to 852.10 μg/mL with a mean of 700.82. Statistical analysis confirmed the pronounced superiority of modification 1 over the control (and other tested modifications) in terms of DNA purity and yield. The results obtained allow us to recommend modification 1 of the CTAB protocol for DNA extraction from plant material of sour and sweet cherry.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>вишня обыкновенная</kwd><kwd>черешня</kwd><kwd>ЦТАБ</kwd><kwd>экстракция ДНК</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>sour cherry</kwd><kwd>sweet cherry</kwd><kwd>CTAB</kwd><kwd>DNA extraction</kwd></kwd-group><funding-group><funding-statement xml:lang="ru">Исследования выполнены в соответствии с государственным заданием ФГБНУ ФНЦ Садоводства по теме «Создание методологической платформы биотехнологических процессов и разработка элементов технологий управления генетическим потенциалом селекционных форм плодовых и ягодных культур» (FGUW-2025-0001).</funding-statement><funding-statement xml:lang="en">The research was carried out within the state order of FSBSO ARHCBAN for the topic «Creation of a methodological platform of biotechnological processes and development of elements of technologies for management of genetic potential of selection forms of fruit and berry crops» (FGUW-2025-0001).</funding-statement></funding-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Клименко И. А. и др. Эффективный способ выделения ДНК для ПЦР-анализа из «балк-образцов» проростков, Адаптивное кормопроизводство. 2021;3(47):29-48. DOI: 10.33814/AFP-2222-5366-2021-3-29-48.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Клименко И. А. и др. Эффективный способ выделения ДНК для ПЦР-анализа из «балк-образцов» проростков, Адаптивное кормопроизводство. 2021;3(47):29-48. DOI: 10.33814/AFP-2222-5366-2021-3-29-48.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Токмаков С. В., Супрун И. И., Ильницкая Е. Т. ДНК-маркерные технологии в изучении генетического разнообразия плодовых культур и винограда. Москва.2023;17:103-104.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Токмаков С. В., Супрун И. И., Ильницкая Е. Т. ДНК-маркерные технологии в изучении генетического разнообразия плодовых культур и винограда. Москва.2023;17:103-104.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Рябушкина Н. А., Омашева М. Е., Галиакпаров Н. Н. Специфика выделения ДНК из растительных объектов, Биотехнология. Теория и практика. 2012;2:9-26.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Рябушкина Н. А., Омашева М. Е., Галиакпаров Н. Н. Специфика выделения ДНК из растительных объектов, Биотехнология. Теория и практика. 2012;2:9-26.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Сейтаджиева С. Б. и др. Оптимизация методики выделения ДНК для изучения генетического разнообразия эфиромасличных роз (Rosa L.), Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2024;185(3):191-198. DOI: 10.30901/2227-8834-2024-3-191-198.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Сейтаджиева С. Б. и др. Оптимизация методики выделения ДНК для изучения генетического разнообразия эфиромасличных роз (Rosa L.), Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2024;185(3):191-198. DOI: 10.30901/2227-8834-2024-3-191-198.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Дрейпер Д. и др. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство. Учебное издание. Мир. 1991.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Дрейпер Д. и др. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство. Учебное издание. Мир. 1991.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Doyle J. J., Doyle J. L. A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue, Phytochemical bulletin. 1987.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Doyle J. J., Doyle J. L. A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue, Phytochemical bulletin. 1987.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
